Son règne est considéré comme une période d'expansion et de prospérité pour l'Empire byzantin, avec des conquêtes militaires importantes en Afrique du Nord, en Italie, en Espagne et en Perse. Justinien est également connu pour son travail en matière de législation, notamment la promulgation des Codex Iustinianus (Code Justinien) et les Novellae Constitutiones (Novelles). Ces lois ont largement influencé le droit romain, qui constitue encore aujourd'hui une grande partie du droit civil en Europe et dans de nombreux autres pays.
La vie de Justinien est marquée par plusieurs conflits politiques et religieux. Il a dû faire face à des révoltes internes et à des invasions barbares, notamment les Ostrogoths menés par le roi Théodoric le Grand. Les relations entre Justinien et l'Église catholique ont également été tendues, avec une série de controverses doctrinales qui ont mené à la schismatique du Grand Éclatement entre l'Église orthodoxe orientale et l'Église catholique occidentale.
Justinien est également connu pour son rôle dans la reconstruction de Constantinople, la capitale byzantine, qui fut dévastée par un tremblement de terre en 532. Il a été construite la célèbre basilique San Vitale à Ravenne, en Italie, et il est considéré comme l'un des grands mécènes artistiques de son temps.
Sa mort en 565 marqua le début d'une période de crise pour l'Empire byzantin, avec un déclin de la puissance militaire et une fragmentation territoriale. Toutefois, son influence continue à être sentie aujourd'hui dans de nombreux domaines, notamment dans les sciences politiques, juridiques et artistiques.