Après des études à la Miss Porter School de Farmington et au Vassar College, Iris Du Pont s'intéresse très tôt aux arts, particulièrement au théâtre et à la danse. Elle fait ses débuts sur scène à l'âge de 20 ans en tant que ballerine professionnelle, mais c'est à partir des années 1920 que sa carrière prend vraiment son essor.
Iris Du Pont s'illustre comme une actrice et une danseuse de caractère, travaillant avec les plus grands metteurs en scène du théâtre américain de l'époque, tels que Eugene O'Neill ou George Cukor. Elle fait ses débuts à Broadway en 1927 dans la pièce *The Captains of Industry*, écrite par son frère Robert Edmund Du Pont. Elle y incarne le rôle-titre, celui de Lady Maud.
En 1936, elle épouse William C. Bullitt, un diplomate américain qui a occupé les fonctions de Secrétaire d'État des États-Unis et qui était à l'époque ambassadeur des États-Unis en France. Le couple vivait principalement à Paris, où Iris Du Pont poursuivait sa carrière artistique.
Iris Du Pont a joué dans plusieurs films, notamment *Cleopatra* (1934), *L'Affaire Charles Lindbergh* (*The Trial of Lizzie Borden*) en 1935 et *La Petite Cornouille* (1938). Sa carrière cinématographique a pris fin dans les années 1940, bien qu'elle ait continué à se produire sur scène.
Iris Du Pont s'est également investie dans de nombreuses causes humanitaires et artistiques. Elle est notamment connue pour ses luttes en faveur des victimes du nazisme pendant la Seconde Guerre mondiale. Iris Du Pont meurt le 27 février 1990 à New York, à l'âge de 93 ans. Son nom reste cité dans les annales du théâtre et du cinéma américain comme un exemple d'artiste étoffée mais talentueuse, qui a su combiner sa passion pour le théâtre avec une vie mondaine et socialement engagée.