Jean-Pierre Busi naît le 15 janvier 1946 à Paris. Il grandit dans un environnement artistique, son père étant peintre et sculpteur. Après des études secondaires classiques, il poursuit une formation de technicien supérieur à l'Institut national des sciences appliquées (INSA) de Paris.
En 1968, il rencontre le réalisateur Claude Lelouch et tourne dans son film "Un homme et une femme". Cela marque le début d'une carrière cinématographique prolifique pour Jean-Pierre Busi, qui jouera notamment dans des films de Claude Lelouch, mais aussi dans des productions réalisées par Henri Verneuil, Jacques Deray, Yves Boisset et Claude Chabrol.
En 1970, il est choisi pour incarner le personnage principal du feuilleton télévisé "Les Faucheurs", qui connait un grand succès populaire. Il remporte également de nombreux prix et distinctions dans les années 1970 et 1980, notamment le Prix Méliès en 1972 pour sa performance dans le film "Le Chat".
Dans les années 1980, Jean-Pierre Busi diversifie sa carrière en se tournant vers la télévision. Il présente de nombreux émissions, notamment "Champs-Élysées" et "Cinéma" sur France 2.
Au début des années 1990, il revient au cinéma avec des rôles dans des films de Claude Lelouch ("L'Amour en fuite") et Henri Verneuil ("Le Juge Fayet"). Il continue à travailler à la télévision et à présenter des émissions jusqu'à son décès le 14 juillet 2015.
Jean-Pierre Busi a été marié deux fois et est le père de trois enfants. Il a également été un militant actif pour les droits humains et a notamment participé à des actions en faveur des Palestiniens et des autochtones du Québec.