Anne Van Hout a reçu une éducation catholique et a étudié l'art dramatique à l'Institut Supérieur d'Art Dramatique de Bruxelles. Elle fait ses débuts sur scène en 1975, avant d'obtenir son premier rôle au cinéma en 1983 dans le film *Les Années grises* (en néerlandais : De Jaren van 't Scheppen).
En 1984, elle joue dans la série télévisée néerlando-française *Café Moka*, qui marque le début de sa collaboration avec le réalisateur belge Stany Crets. Ils travaillent ensemble sur plusieurs projets, notamment les films *Spoed* (1987), *La Vraie Nature de Bernadette* (1995) et la série télévisée *Zone Blanche* (2016).
En 1987, Anne Van Hout joue dans le film *De Stille Kracht*, qui est sélectionné au Festival international du film de Locarno. Elle reçoit également des nominations pour les prix du cinéma néerlandais pour son rôle dans ce film.
En 1994, elle interprète l'une des rôles principaux dans la série télévisée *De Rode Leeuw*, qui est une adaptation de la comédie musicale belge éponyme. La série rencontre un grand succès et Anne Van Hout reçoit le prix du meilleur acteur pour sa performance au Festival International de la Télévision de Monte-Carlo en 1995.
En 2006, elle retrouve Stany Crets pour tourner dans le film *La Marche des Pénitents*. En 2017, elle joue dans le téléfilm *De Rode Leeuw: Een nieuwe generatie* qui marque le retour de la série *De Rode Leeuw* après une absence de 23 ans.
Anne Van Hout est aussi connue pour son implication dans des causes humanitaires et écologiques. Elle est ambassadrice de l'association belge Alzheimer Belgium, qui lutte contre la maladie d'Alzheimer. Elle est également engagée dans plusieurs projets écologistes, notamment en faveur du réchauffement climatique et de la protection des animaux.
Au-delà de sa carrière d'actrice, Anne Van Hout est connue pour son style vestimentaire avant-gardiste et ses fréquentes apparitions dans les magazines de mode. Elle a également coécrit un livre intitulé *Le Livre des Soupçons* (en néerlandais : Het Boek van Verdenkingen), qui est publié en 2016.
Aujourd'hui, Anne Van Hout continue de jouer dans des films et des séries télévisées, notamment la série *Zone Blanche*, diffusée sur Netflix. Elle est considérée comme une des actrices les plus talentueuses du cinéma belge et de la télévision néerlandophone.